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                抗壞血酸氧化酶(AAO)生化檢測試劑盒

                型 號

                產品時間2023-11-06

                所屬分類C代謝系列

                報價300

                產品描述:抗壞血酸氧化酶(AAO)生化檢測試劑盒AAO是定位于植物細胞壁的糖蛋白,屬“藍銅氧化酶"家族。細胞壁內的抗壞血酸和AAO與細胞壁的代謝和生長有著密切的聯系。AAO 氧化 AsA 所形成的 MDHA 可通過質膜上的細胞色素b還原,該過程中電子的跨膜運輸能夠促進細胞生長。

                產品概述

                商品屬性:

                產品名稱:抗壞血酸氧化酶(AAO)生化檢測試劑盒

                規格:100/96 50/48 

                貨號 : EY-01S141

                測試方法:微量法 紫外分光光度法  

                分類:C代謝系列

                商品詳情:

                測定意義:

                AAO是定位于植物細胞壁的糖蛋白,屬藍銅氧化酶"家族。細胞壁內的抗壞血酸和AAO與細胞壁的代謝和生長有著密切的聯系。AAO 氧化 AsA 所形成的 MDHA 可通過質膜上的細胞色素b還原,該過程中電子的跨膜運輸能夠促進細胞生長。

                測定原理:

                AAO可直接氧化AsA,通過測定AsA的氧化量,可計算得AAO活力。

                實驗中所需儀器及設備:

                低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調式移液器、研缽、冰、蒸餾水。

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                ADH測定操作:

                1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。

                2. 試劑三在25℃水浴中保溫30 min。

                3. 在1mL石英比色皿中依次加入100μL樣本上清液、800μL試劑三和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2?!鰽測定管=A1-A2。

                測定步驟:

                1、分光光度計預熱30min以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。

                2、將試劑二在37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴10min以上。

                3、操作表:

                試劑名稱μL

                測定孔

                樣本

                20

                試劑二

                760

                試劑三

                10

                試劑四

                10


                將上述試劑按順序加入1 mL石英比色皿中,混勻后立即在340 nm波長下記錄初始吸光度A1和反應1min后的吸光度A2,計算ΔA=A1-A2。

                注意:若A1-A2大于0.5,需將樣本用提取液稀釋,使A1-A2小于0.5,可提高檢測靈敏度。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

                NAD-MDH活力單位的計算:

                1、血清(漿)NAD-MDH活力的計算

                單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

                NAD-MDH(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=6430×ΔA

                2、組織、細菌或細胞中NAD-MDH活力的計算:

                (1)按樣本蛋白濃度計算:

                單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

                NAD-MDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=6430×ΔA÷Cpr

                (2)按樣本鮮重計算:

                單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

                NAD-MDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總)÷T =6430×ΔA÷W

                (3)按細菌或細胞密度計算:

                單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

                NAD-MDH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總)÷T=3.215×ΔA

                V反總:反應體系總體積,8×10-4 L;ε:NADH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.02mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,1 min;W:樣本質量,g;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;2000:細胞或細菌總數,2000萬。

                公司正在銷售的產品:

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                聚蛋白胨/多聚蛋白胨/多價蛋白胨/Polypeptone  BR  250/500/1000  國產/進口

                李克犁頭霉或傘枝梨頭霉   獸用消毒劑指標菌  /

                 



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