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                產品中心/PRODUCTS

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                土壤N乙酰βD糖苷酶(SNAG)生化檢測試劑盒

                型 號

                產品時間2023-11-07

                所屬分類土壤系列

                報價300

                產品描述:土壤N乙酰βD糖苷酶(SNAG)生化檢測試劑盒S-NAG是溶酶體中的一種酸性水解酶,由土壤微生物分泌。S-NAG活性變化與機體某些病理狀態密切相關。

                產品概述

                商品屬性:

                產品名稱:土壤N乙酰βD糖苷酶(SNAG)生化檢測試劑盒

                規格:100/48 50/24 100/96

                貨號 : EY-01S1304

                測試方法:微量法 可見分光光度法 熒光法 

                分類:土壤系列

                商品詳情:

                測定意義:                         

                S-NAG是溶酶體中的一種酸性水解酶,由土壤微生物分泌。S-NAG活性變化與機體某些病理狀態密切相關。

                測定原理:

                S-NAG分解β-N-乙酰氨基糖苷生成對-,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算NAG活性。

                自備用品:

                可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。

                粗酶液提?。?/p>

                1、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測。

                2、細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測。

                3、血清等液體:直接測定。


                5.png



                ADH測定操作:

                1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。

                2. 試劑三在25℃水浴中保溫30 min。

                3. 在1mL石英比色皿中依次加入100μL樣本上清液、800μL試劑三和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2?!鰽測定管=A1-A2。

                測定步驟:

                1、分光光度計預熱30min以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。

                2、將試劑二在37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴10min以上。

                3、操作表:

                試劑名稱μL

                測定孔

                樣本

                20

                試劑二

                760

                試劑三

                10

                試劑四

                10


                將上述試劑按順序加入1 mL石英比色皿中,混勻后立即在340 nm波長下記錄初始吸光度A1和反應1min后的吸光度A2,計算ΔA=A1-A2。

                注意:若A1-A2大于0.5,需將樣本用提取液稀釋,使A1-A2小于0.5,可提高檢測靈敏度。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

                NAD-MDH活力單位的計算:

                1、血清(漿)NAD-MDH活力的計算

                單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

                NAD-MDH(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=6430×ΔA

                2、組織、細菌或細胞中NAD-MDH活力的計算:

                (1)按樣本蛋白濃度計算:

                單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

                NAD-MDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=6430×ΔA÷Cpr

                (2)按樣本鮮重計算:

                單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

                NAD-MDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總)÷T =6430×ΔA÷W

                (3)按細菌或細胞密度計算:

                單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

                NAD-MDH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總)÷T=3.215×ΔA

                V反總:反應體系總體積,8×10-4 L;ε:NADH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.02mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,1 min;W:樣本質量,g;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;2000:細胞或細菌總數,2000萬。

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